MADRID, 9 May. (EUROPA PRESS) -
Un equipo del Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO) ha perfeccionado un sistema basado en la técnica de edición genómica CRISPR que permite recrear el sarcoma de Ewing en modelos celulares, tanto en células madre humanas adultas como embrionarias.
El sistema, que detallan en la revista 'Stem Cell Reports', permitirá generar modelos celulares para analizar los mecanismos que subyacen a la aparición y desarrollo de ésta y otras enfermedades, así como la búsqueda de nuevos tratamientos.
"La idea es tener un sistema que permita generar un modelo lo más fidedigno posible a lo que está pasando en un tumor", ha señalado Sandra Rodríguez Perales, investigadora de la Unidad de Citogenética Molecular e Ingeniería Genómica del CNIO que ha liderado el trabajo.
Con un modelo que reproduzca los orígenes de la enfermedad será posible analizar los mecanismos y bases moleculares que subyacen a cada patología. En el caso del sarcoma de Ewing, el desencadenante es una translocación entre los cromosomas 11 y 22, que da lugar a la fusión de dos genes, generando un nuevo oncogén.
Los autores ya habían empleado CRISPR para inducir esta alteración y generar un modelo de esta enfermedad, pero se habían topado con una baja eficacia y otras dificultades metodológicas al aplicar la técnica en células madre humanas.
"Cuando trabajábamos con líneas celulares, todo iba como la seda, pero cuando lo hacíamos con células madre, encontrábamos muchos problemas", ha explicado Raúl Torres Ruiz, coautor del estudio.
ESTRATEGIAS PARA MEJORAR LA TÉCNICA
Con el fin de mejorar sus resultados y de afinar la técnica, compararon tres estrategias para generar esta translocación de la forma más eficaz posible utilizando CRISPR. Tras varios experimentos, observaron que combinando el uso de un complejo ribonucleoproteico sgRNA-Cas9 generado en el laboratorio (en lugar de un plásmido de expresión) y de una "grapa" de ADN --una secuencia corta que une los extremos de los dos cromosomas que rompe el sistema CRISPR y que facilita por tanto la producción de la translocación-- la tasa de éxito se multiplicaba hasta por siete.
Esto indica, según los autores, que se trata de una "herramienta sólida para [inducir] translocaciones dirigidas". Además, todas las mejoras aplicadas durante el estudio han permitido a los autores generar dicho modelo en células madre pluripotentes inducidas (iPSC), que poseen un gran potencial desde el punto de vista científico, dado que constituyen un modelo celular idóneo para el estudio del desarrollo de distintas patologías, entre ellas los estadios iniciales de procesos oncogénicos.
Todo ello permitirá el estudio de las bases mecanísticas de patologías como el sarcoma de Ewing. Es decir, no sólo puede ser útil para este sarcoma sino que es "una aproximación válida también para otras patologías", ha subrayado Rodríguez Perales.
"Esta estrategia facilitará la creación de modelos de cáncer con células madre humanas y la edición genómica de precisión para la búsqueda de nuevos fármacos o terapias celulares, acelerando así el paso del laboratorio a la clínica", según concluyen.
